Mesure de la demande biologique en oxygène 5 jours à l'aide d'une sonde à oxygène
Protocole:
1. Préparation de l'eau de dilution. Incuber une cruche contenant de l'eau déminéralisée, à 20°C, pendant une nuit; ensuite introduire une solution nutritive.
Saturer cette eau en oxygène en y faisant barboter de l'air à grand débit avec un aérateur pendant l'équivalent de 5min/litre d'eau. Cette solution doit être préparée
à chaque utilisation.
2. Pour l'analyse de la DBO5, ajouter 0,75 mL de la solution d'ATU 0,2 % dans chacune des bouteilles.
3. Effectuer la calibration de l'électrode de la sonde à oxygène à chaque utilisation en plaçant celle-ci dans une bouteille contenat quelques millilitres d'eau distillée et en
suivant les indications fournies par le manufacturier.
4. Déterminer le taux de dilution à partir de la concentration attendue en DBO5
5. Homogénéiser l'échantillon et effectuer les dilutions. S'il faut mesurer 3mL ou moins, faire une dilution 1/10, 1/100, etc., et mesurer en conséquence; par exemple
prendre 20 mL d'une solution par 100 m, au lieu de pipeter 0,2 mL de l'échantillon nature.
6. Dans un contenant de 300 mL, ajouter 2 mL de la solution de semence bactérienne et compléter à 300 mL avec de l'eau de dilution. De la même façon, préparer des
solutions témoins contenant uniquement de l'eau de dilution ainsi que des solutions témoins contenant de l'eau de dilution er 2 mL de la solution de
semence bactérienne.
7. Attendre 10 minutes avant de prendre la première lecture.
8. Mesurer l'oxygène dissous avec l'électrode de la sonde à oxygène en suivant les instructions du manufacturier.
9. Boucher hermétiquement la bouteille avec le bouchon de verre à joint rodé. S'assurer qu'il y ait un surplus d'eau dans le goulot évasé de la bouteille.
10. Presser un capuchon de polyéthylène sur le goulot de la bouteille afin de prévenir l'évaporation pendant l'incubation.
11. Après 5 jours, sortir les échantillons, les solutions témoins et la solution étalon de l'incubateur.
12. Enlever les capuchons de polyéthylène, retenir fermement le bouchon de verre en place et inverser la bouteille pour se débarrasser du surplus d'eau qui a résidé
dans le goulot.
13. Enlever le bouchon de verre à joint rodé immédiatement avant chaque lecture et lire la quantité d'oxygène dissous final avec l'électrode de la sonde à oxygène dissous.
14. Les résultats sont valides lorsque la concentration résiduelle d'oxygène est d'au moins 1 mg/L O2 et lorsqu'au moins 1 mg/L O2 a réagi durant l'incubation.
15. Le blanc d'eau de dilution avec l'ensemencement de doit pas excéder une consommation de 0,5 mg/L O2 après 5 jours d'incubation.
16. Calculez la concentration à l'aide de l'équation suivante:
DBO = (D1-D2) - (B1-B2)f
P
D1 = OD de l'échantillon dilué après 15 minutes (g/m)3
D2 = OD de l'échantillon dilué après incubation (g/m)3
D3 = OD témoin avant incubation (g/m)3
D4 = OD témoin après incubation (g/m)3
P = Vs / 300 mL
f = % ensemencement dans D1
% ensemencement dans B1
|
